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基于羧基载体LX-1000IDA的脂肪酶固定化研究
被引：4
|作者：
朱衡
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张继福
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张云
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胡云峰
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机构：
[1] 中国科学院南海海洋研究所
[2] 中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室(中国科学院南海海洋研究所)
[3] 南方海洋科学与工程广东省实验室(广州)
[4] 中国科学院大学
[5] 广东省中医院
基金：
广东省自然科学基金;
关键词：
海洋脂肪酶;
固定化;
羧基载体;
1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺;
酶学性质;
D O I：
10.16088/j.issn.1001-6600.2020.06.011
中图分类号：
Q814.2 [固定化酶和固定化细胞技术];
学科分类号：
摘要：
本文利用碳二亚胺EDC作为羧基载体LX-1000IDA的活化剂,通过脂肪酶的表面氨基,将脂肪酶固定于羧基载体上,制成固定化海洋脂肪酶IDA-LIPASE。通过单因素实验、Plackett Burman试验和正交试验,对载体-酶液和交联剂的添加顺序、缓冲液浓度、温度、pH、载体量、时间和碳二亚胺EDC浓度等进行优化和筛选,得到的最佳固定化条件为:pH4.5、载体量0.2 g、时间6 h、温度25℃、EDC质量分数0.6%,制备得到酶活力为114 U/g的固定化酶。对该条件进行了10倍扩大固定化,制备得到的固定化脂肪酶IDA-LIPASE酶活力为210 U/g。对制备的固定化酶酶学性质鉴定表明:固定化酶与游离酶相比,最适反应温度提高10℃,最适反应pH向碱性方向移动0.5,重复使用7次还保留40%左右的酶活,具有优异的热稳定性;固定化酶在4℃保存30 d后保留84.6%酶活。该固定化酶IDA-LIPASE相比于游离酶更能适应工业生产环境,具备实际生产应用的潜力和价值。
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