树脂固定化酶的制备及其在低pH值葡萄糖酸生产工艺中的应用

分别利用强碱性大孔树脂、氨基树脂、环氧树脂作为葡萄糖氧化酶（GOD）和过氧化氢酶（CAT）固定化载体制备固定化酶，并研究其在低pH值葡萄糖酸生产工艺中的应用效果。耐酸性试验表明固定化酶较游离酶具有更强的耐酸性能。分别利用游离酶和3种固定化酶在低pH值（pH值3.5）条件下制备葡萄糖酸，强碱性大孔树脂、氨基树脂和环氧树脂固定化酶所需反应时间分别为40 h、24 h和27 h，酶活损失率分别为46.44%、3.42%和21.84%，而游离酶在反应过程中完全失活。3种固定化酶反应液的澄清度及色度均显著优于游离酶反应液。正交试验进一步优化后氨基树脂固定化酶的制备工艺为混合酶液浓度10%、GOD:CAT=1.5:1、固定温度25℃。在该条件下，氨基树脂固定化酶的酶活回收率可达93.15%，转化100 g/L葡萄糖溶液所需时间为23 h，反应结束时葡萄糖酸:葡萄糖酸钠可达0.899:1(m/m)。并且氨基树脂固定化酶稳定性良好。因此，利用氨基树脂固定化酶可以建立低pH值固定化酶葡萄糖酸生产工艺，实现高品质葡萄糖酸产物的生产。