miR-7a-5p负调控Rac1表达参与HepG2细胞胰岛素抵抗

目的：探讨软脂酸诱导胰岛素抵抗的HepG2细胞中微小RNA-7a-5p(microRNA-7a-5p, miR-7a-5p是否通过调控Ras相关C3肉毒毒素底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1, Rac1)表达参与细胞胰岛素抵抗。方法：应用生物信息学分析预测其下游靶分子，构建含Rac1 3′端非翻译区的野生型及突变型hsa-Rac1萤光素酶报告质粒，与miR-7a-5p表达慢病毒或对照空载慢病毒共转染293T细胞，检测萤光素酶活性。HepG2细胞分为软脂酸诱导的胰岛素抵抗组和正常对照组，RT-qPCR分析两组细胞miR-RNA-7a-5p的表达，Western blot分析下游靶分子蛋白的表达。HepG2细胞分为干扰慢病毒转染组和对照慢病毒转染组，转染之后，软脂酸诱导两组细胞胰岛素抵抗，分析两组HepG2细胞中脂质堆积及葡萄糖消耗情况。结果：生物信息学预测Rac1为miR-7a-5p下游分子。野生型hsa-Rac1萤光素酶报告质粒与miR-7a-5p表达慢病毒共转染后，萤光素酶较对照组显著降低（P<0.05）。胰岛素抵抗的HepG2与对照细胞组相比，miR-7a-5p表达显著下调（P<0.05）,Rac1蛋白表达显著上调（P<0.05）。较对照相比，Rac1 mRNA的表达抑制增加了胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗（P<0.05），降低了胞质内脂质堆积（P<0.05）。结论：miR-7a-5p的一个潜在靶点是Rac1。miR-7a-5p通过负调节Rac1表达参与软脂酸诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗。