Effect of pancreatic micromolecular active peptides on the apoptosis of the rat islet cells induced by H2O2 in vitro

被引:0
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作者
徐艳花 [1 ]
王洪敏 [2 ]
张振 [1 ]
杨蕾 [3 ]
蔡德鸿 [1 ]
陈光明 [2 ]
陈宏 [1 ]
机构
[1] 南方医科大学附属珠江医院内分泌科
[2] 解放军第四五八医院免疫缺陷病研究与特殊实验中心
[3] 南方医科大学附属珠江医院肾内科
关键词
过氧化氢; 胰腺小分子活性肽; 胰岛细胞; 凋亡; 大鼠;
D O I
暂无
中图分类号
R587.1 [糖尿病];
学科分类号
1002 ; 100201 ;
摘要
目的研究胰腺小分子活性肽对H2O2诱导体外大鼠胰岛细胞凋亡的影响。方法采用胶原酶消化和组织培养法分离纯化大鼠胰岛细胞,检测其纯度与活性。对照组加入普通培养基,实验组培养基中加入不同质量浓度(100、200、300、400μg/ml)胰腺小分子活性肽,阳性对照组培养基中加入100nmol/L艾塞那肽。每组细胞做5个复孔(n=5),培养5d后每组均接受H2O2100μmmol/L处理1h。采用Hoechst33258核染色形态学观察;AnnexinV-FITC/PI双染色流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;荧光定量PCR法检测bax、bcl-2及caspase3mRNA的表达;Western-bolt检测bax、bcl-2蛋白的表达。结果 300、400μg/ml胰腺小分子活性肽和阳性对照组胰岛细胞凋亡率小于对照组(P<0.05);300、400μg/ml胰腺小分子活性肽组胰岛细胞bcl-2蛋白表达高于对照组(P<0.05),bax与caspase3蛋白表达低于对照组(P<0.05);300、400μg/ml胰腺小分子活性肽组胰岛细胞bcl-2mRNA的表达高于对照组(P<0.05),且bax mRNA的表达低于对照组(P<0.05)。结论胰腺小分子活性肽在浓度为300、400μg/ml时对大鼠胰岛细胞凋亡有明显保护作用。
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