Pre-miR172及miR172调控油菜AP2基因表达的规律分析

为探究油菜miR172前体(pre-miR172)及成熟体(miR172)对AP2基因的调控功能，该研究通过生物信息学方法对miR172和AP2启动子进行调控元件预测，分析6条油菜AP2基因的进化关系及miR172与AP2的靶向关系；通过qRT-PCR方法检测AP2、miR172和pre-miR172在早熟和晚熟油菜不同组织的表达规律；比较分析miR172丰度和AP2表达量间的相关关系，以及比较分析pre-miR172和miR172在表达水平上的相关关系；通过过表达pre-miR172,再次验证pre-miR172对成熟体miR172及AP2的作用。结果表明：(1)miR172和AP2启动子区均存在调控花发育的顺式元件。(2)6条AP2序列均经历了强烈的纯化选择，均具备miR172的结合位点，属miR172的靶基因。(3)miR172家族成员均可促进早熟油菜AP2表达，但miR172d作用不明显。在晚熟油菜中，miR172a和miR172c作用微弱，miR172b和miR172d二者共同发挥作用降低AP2的表达水平。(4)pre-miR172家族对于早熟油菜中miR172家族的表达水平均有促进作用；在晚熟油菜中pre-miR172a和pre-miR172b对其成熟序列的形成发挥正调控作用，pre-miR172c和pre-miR172d则对于其成熟序列的形成发挥负调控作用。过表达pre-miR172后，miR172和AP2表达规律与上述结果保持一致，证实pre-miR172对miR172及AP2的调控功能。该研究结果丰富了油菜AP2基因的功能调控路径，为基因的调控功能研究提供了新的思路。