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- [3] 猪繁殖和呼吸系统综合征的血清学检测及病毒的分离和鉴定(初报)[J]. 中国兽医杂志, 1996, (05) : 6 - 8陈博文孙颖杰罗长保孙延峰潘凤城林志雄苏永生李树根童昆周
PRRSV JL/07/SW毒株GP5基因克隆与真核表达
被引：1
|作者：
白晶
[1
,2
]
剡根强
[1
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丁壮
[2
]
陈创夫
[1
]
李志杰
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]
丛彦龙
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]
母连志
[2
]
机构：
[1] 新疆石河子大学动物科技学院
[2] 吉林大学畜牧兽医学院
来源：
关键词：
PRRSV;
GP5基因;
真核表达;
D O I：
10.16303/j.cnki.1005-4545.2010.05.013
中图分类号：
S852.65 [家畜病毒学];
学科分类号：
摘要：
根据PRRSV VR-2332毒株核苷酸序列,设计针对GP5基因的特异引物,以PRRSVJL/07/SW毒株细胞培养物为模板,利用RT-PCR方法,成功的扩增出GP5基因,将该基因与真核表达载体pCI-neo连接,转染Marc-145细胞中,用间接免疫荧光试验、SDS-PAGE和western-blot鉴定目的蛋白的表达。结果:RT-PCR分别扩增出GP5基因大小与预期一致,与国际PRRSV美洲型VR-2332毒株的GP5基因序列同源率为89.2%;间接免疫荧光、SDS-PAGE及Western blot试验证明GP5蛋白在Marc-145细胞中成功表达;同时利用pCI-neo真核表达载体在Marc-145细胞中成功表达了PRRSVJL/07/SW毒株GP5基因,为下一步研究蛋白的功能奠定了基础。
引用
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