丁香疫霉菌RPA/CRISPR-Cas12a快速检测方法的建立

被引：11

作者：

雷荣 ^{[1
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孙夕雯 ^{[2
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江丽 ^{[1
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王振华 ^{[3
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李国庆 ^{[4
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李远 ^{[5
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廖晓玲 ^{[6
]}

吴品珊 ^{[1
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机构：

[1] 中国检验检疫科学研究院

[2] 沈阳农业大学土地与环境学院

[3] 武汉海关

[4] 华中农业大学

[5] 重庆医科大学永川附属医院

[6] 重庆理工大学

来源：

植物检疫 | 2022年 / 36卷 / 03期

基金：

国家重点研发计划;

关键词：

丁香疫霉病菌; 重组酶聚合酶扩增; CRISPR-Cas12a; 快速检测;

D O I：

10.19662/j.cnki.issn1005-2755.2022.03.006

中图分类号：

S41-30 [植物病害、虫害及杂草检疫];

学科分类号：

摘要：

丁香疫霉病菌（Phytophthora syringae,PS）造成数十种蔷薇科植物严重病害，是我国的植物检疫性有害生物。本研究根据GenBank中PS的Ras-like protein (Ypt1)基因，建立重组酶聚合酶等温扩增结合CRISPR-Cas12a系统的荧光法和侧向流层析试纸条快速检测方法，以实现在田间或口岸快速、准确、灵敏检测丁香疫霉病菌的目的。本研究优化了RPA/CRISPR-Cas12a的反应条件，考察了特异性、灵敏度以及实际样品检测能力。结果表明，该方法 37℃扩增40 min，能特异性地检测丁香疫霉菌，灵敏度为133 fg，与荧光定量PCR相当。本研究建立的快速检测方法可用于丁香疫霉菌的快速诊断。

引用

页码：31 / 38

页数：8

共 29 条

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