SLC22A18基因启动子甲基化与胶质瘤SLC22A18表达的关系

目的探讨胶质瘤中SLC22A18基因启动子甲基化与其表达的关系。方法选取上海交通大学医学院附属第三人民医院神经外科自2006年9月至2009年6月、武汉大学中南医院神经外科自2002年9月至2005年6月间手术切除的胶质瘤标本30例,另选10例行内减压术颅脑损伤患者的正常脑组织作为对照。采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测标本中SLC22418基因启动子甲基化的状态,RT-PCR和Western blotting分别检测SLC22A18 mRNA和蛋白的表达。体外培养胶质瘤U251细胞于含2μmol/L去甲基化药物5-aza-2-deoxycytidine的培养液(实验组)中,同时设普通培养液作对照,培养3、5、7 d后进行细胞计数并应用Western blouing检测SLC22A18蛋白的表达。结果 MSP检测结果显示15例胶质瘤组织出现甲基化,对照脑组织均表现出非甲基化;15例甲基化胶质瘤组织中SLC22A18mRNA、蛋白的表达明显低于对照脑组织。培养5、7 d实验组U251细胞计数少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。培养7 d Westernblotting检测结果发现实验组细胞SLC22A18蛋白的表达明显高于对照组。结论 SLC22A 18基因启动子甲基化导致其表达下调;去甲基化药物能恢复U251细胞SLC22A18的表达,并抑制U251细胞增殖。