鸡贫血病毒VP1、VP2和VP3基因酵母双杂交载体的构建及其自激活活性的鉴定

被引：1

作者：

孙芬芬 ^{[1
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高玉龙 ^{[1
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高宏雷 ^{[1
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祁小乐 ^{[1
]}

潘伟 ^{[1
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王笑梅 ^{[1
]}

机构：

[1] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

[2] 黑龙江省农业科学院

来源：

中国兽医科学 | 2010年 / 40卷 / 02期

关键词：

鸡贫血病毒; 蛋白相互作用; 酵母双杂交载体; 自激活作用;

D O I：

10.16656/j.issn.1673-4696.2010.02.001

中图分类号：

S852.65 [家畜病毒学];

学科分类号：

摘要：

为构建鸡贫血病毒(CAV)VP1、VP2、VP3基因酵母双杂交载体并鉴定其自激活作用,从CAV细胞传代毒M9905毒株中提取基因组DNA,利用PCR分别扩增VP1、VP2和VP3基因,采用Gateway技术将VP1、VP2和VP3基因分别克隆到酵母双杂交载体pDEST32和pDEST22中,构建了诱饵载体及猎物载体,经酶切和PCR鉴定且测序正确后,用醋酸锂法转化酵母菌株Mav203,通过缺陷型平板SD/-Leu/-Trp/-His和SD/-Leu/-Trp/-Ura筛选以及LacZ报告基因检测载体有无自激活作用。结果表明,成功构建了诱饵载体pDEST32-VP1/VP2/VP3和捕获载体pDEST22-VP1/VP2/VP3,并证明其VP1、VP2和VP3蛋白在酵母双杂交系统中无自激活作用。研究结果为下一步利用酵母双杂交系统探索CAVVP1、VP2、VP3蛋白之间的相互作用奠定了基础。

引用

页码：111 / 115

页数：5

共 4 条

[1] IBDV强、弱毒VP2诱饵载体构建及在酵母双杂交系统中自激活作用的检测
李铁强
高玉龙
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王笑梅
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衣翠玲
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