共 2 条
c-myc和K-ras对小鼠卵巢上皮细胞体外转化和体内致瘤的研究
被引:0
|作者:
姚德生
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李力
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Kenneth Garson
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Barbara CVanderhyden
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机构:
[1] 广西医科大学肿瘤医院妇瘤科
[2] 加拿大渥太华大学癌症中心
来源:
关键词:
逆转录病毒载体;
卵巢肿瘤;
K-ras;
c-myc;
基因转移;
移植瘤模型;
D O I:
暂无
中图分类号:
R737.31 [卵巢肿瘤];
学科分类号:
摘要:
目的探讨癌基因c-myc和K-ras在卵巢癌发生发展中的作用。方法用逆转录病毒转基因系统,将正常的c-myc基因和突变的K-ras基因先后导入小鼠卵巢上皮(MOSE)细胞,建立表达c-myc和K-ras基因的细胞株,分别称为MOSE-Myc细胞、MOSE-Ras细胞和MOSE-RM细胞。通过细胞增殖实验、克隆形成实验、体外侵袭实验以及体内成瘤实验,研究转基因后MOSE细胞生物学特性的改变及恶性转化。结果c-myc和K-ras基因容易被重组逆转录病毒导入MOSE细胞,转导后靶细胞内分别有相应的c-myc或K-ras mRNA转录,以及相应的c-myc(62 000)和K-ras(21 000)蛋白的表达。MOSE-Ras组和MOSE-RM(MOSE-Ras/Myc)组细胞增殖能力显著强于MOSE和MOSE-Myc组(P<0.01),MOSE-RM组细胞增殖能力显著强于MOSE-Myc组(P<0.05)。MOSE-Ras和MOSE-RM组在软琼脂培养中均能形成克隆集落,而MOSE组和MOSE-Myc组不能形成克隆集落。MOSE-Ras组和MOSE-RM组能够穿透Matrigel,具有侵袭能力。MOSE-Ras组和MOSE-RM组细胞在裸鼠体内形成肿瘤,且肿瘤组织细胞仍然可见有K-ras和c-myc蛋白的表达;而MOSE组和MOSE-Myc组无肿瘤形成。结论重组逆转录病毒载体作为转基因的工具,转导效率高,可稳定表达,可以感染正常的细胞;突变的K-ras可使MOSE发生恶性转化,在体内形成肿瘤;c-myc作为一个核转录调节因子,不能使MOSE发生恶性转化,但可协同其他因子,加强其他因子的功能。
引用
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