心肌梗死大鼠Angiopoietin2/tie2的动态表达及其与血管新生的关系

目的检测血管生成素2(Ang2)及其受体tie2在大鼠心肌梗死后的表达变化,探讨其与大鼠心肌梗死后血管新生的相关性。方法健康清洁级雄性SD大鼠80只,随机分为假手术组和心肌梗死组(MI组),每组40只。通过结扎左冠状动脉前降支(LAD)建立心肌梗死模型,假手术组只穿线不结扎。分别于术后1 d、3 d、7 d、14 d及28 d五个时间点,每组随机取8只处死,留取大鼠血清、梗死区域及梗死周边区域心肌组织。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中Ang2/tie2的表达,超声心动图评估大鼠心功能,免疫组织化学法观察心肌组织中Ang2及tie2的表达,CD105免疫组织化学法测定心肌梗死边缘区微血管数量并计算微血管密度(MVD)。结果 (1)超声心动图结果示MI组大鼠左室舒张末期内径(LVIDd)较假手术组明显增大(P<0.01),而左室短轴缩短率(LVFS)及左心室射血分数(LVEF)明显降低(P<0.01);MI组术后14 d较术后3 d LVEF与LVFS均上升(P<0.05),LVIDd下降(P<0.05)。(2)ELISA检测结果示除术后1 d组外,其余各个时间点MI组血清Ang2与tie2的蛋白表达水平均高于假手术组(P<0.05)。MI组从术后1 d到术后28 d Ang2的表达依次升高,相对于术后1 d组,3 d、7 d、14 d、28 d组Ang2的表达均明显升高(P<0.01);与术后3d组相比,7 d组及14 d组Ang2的表达量虽有一定升高,但无统计学意义(P>0.05),28 d组Ang2的表达显著升高(P<0.05)。而tie2的表达在术后3 d组略上升,7 d组稍下降,相对于1 d组均无显著升高(P>0.05),在14 d及28 d时明显升高(P<0.01)。(3)免疫组化结果示假手术组大鼠心肌细胞可见Ang2与tie2在各个时间点均仅有少量表达;而MI组可见Ang2与tie2蛋白大量表达,阳性着色较假手术组明显加深,且随着时间的延长,Ang2的表达逐渐增多;tie2的表达在术后1 d、3 d、7 d时无明显变化,在术后14 d、28 d时明显增多。(4)各个时间点MI组大鼠MVD均较假手术组增加,差别均有统计学意义(P<0.05),MI组大鼠从术后1 d到术后7 d MVD逐渐增加,之后维持在同一水平。结论 Ang2/tie2在心肌梗死后表达上调,其表达水平与心肌梗死后边缘区新生血管数量呈正相关,提示Ang2/tie2可能促进心肌梗死后早期新生血管的形成。