过表达Runx2促进C2C12细胞成骨分化

被引：5

作者：

李萍 ^{[1
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余守和 ^{[1
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陈迪 ^{[1
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高忠平 ^{[1
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申健 ^{[1
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时宿妹 ^{[1
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孙奋勇 ^{[1
]}

机构：

[1] 暨南大学生命科学技术学院生物工程研究所

来源：

中国生物化学与分子生物学报 | 2010年 / 26卷 / 03期

关键词：

Runx2; C2C12细胞; Tet-on基因表达系统; 成骨分化;

D O I：

10.13865/j.cnki.cjbmb.2010.03.006

中图分类号：

Q343 [细胞遗传学];

学科分类号：

071007 ; 090102 ;

摘要：

利用Tet-on（Tetracycline-on）基因表达系统,通过强力霉素（doxycycline,DOX）诱导Runx2基因在C2C12细胞中的表达,探究Runx2促成骨分化功能,为其分子机制的研究提供一个理想的实验平台.先后将调控质粒pTet-on和反应质粒pTRE-Flag-Runx2转染入C2C12细胞,并用G418和潮霉素分别进行2轮筛选,运用实时荧光定量PCR选择对强力霉素诱导敏感的细胞克隆.用不同浓度DOX诱导C2C12/Tet/pTRE-Flag-Runx2细胞,蛋白免疫印迹检测Runx2的表达,确定DOX的最佳诱导浓度与时间,并检测C2C12细胞的成骨分化能力.结果表明,诱导细胞最佳DOX浓度为10μg/ml;最佳诱导时间为12h;诱导后Runx2基因高表达,C2C12细胞向成骨方向分化（P<0.05）.成功建立Tet调控Runx2基因表达C2C12细胞系,为进一步研究Runx2基因功能分子机制提供理想的细胞模型.

引用

页码：236 / 242

页数：7

共 22 条

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