MiR-199a-5p对肝星状细胞活化增殖的影响

被引:3
|
作者
王源 [1 ]
刘章心怡 [2 ]
苏静慧 [1 ]
王密斯 [1 ]
张荣花 [1 ]
熊亚南 [1 ]
王梅梅 [1 ]
甄永占 [1 ]
章广玲 [1 ]
机构
[1] 华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室唐山市慢性病临床基础研究重点实验室
[2] 中南大学湘雅医学院
关键词
miR-199a-5p; 肝星状细胞; 细胞增殖; 迁移;
D O I
10.13417/j.gab.040.001324
中图分类号
R575 [肝及胆疾病];
学科分类号
摘要
miR-199a-5p是miRNAs家族的一员。为探讨对人肝星状细胞活化增殖和迁移的影响,为临床肝纤维化治疗提供新的思路,本研究构建miR-199a-5p过表达载体、合成miR-199a-5p反义寡聚核苷酸(antisense oligonucleotide, ASO)经脂质体转染LX-2细胞。采用CCK-8法和Transwell分别检测细胞增殖和迁移能力;集落形成实验检测LX-2细胞的集落形成能力;实时荧光定量PCR技术检测细胞中转染miR-199a-5p后纤维化相关基因α-SMA和CollagenⅠ的mRNA表达水平;Western blot检测各组细胞中α-SMA表达水平。结果表明miR-199a-5p可以促进LX-2细胞增殖(P<0.01)、迁移(P<0.01)和集落形成(P<0.01);而ASO-199a-5p-5p组细胞增殖(P<0.01)、迁移能力(P<0.01)和集落形成能力(P<0.01)受到抑制。RTqPCR结果显示miR-199a-5p在受TGF-β1刺激后的LX-2细胞中的miRNA表达水平高于未受刺激组的(P<0.05),转染miR-199a组细胞中α-SMA的mRNA(P<0.01)和蛋白(P<0.05)表达水平升高。以上结论表明miR-199a-5p过表达能促进肝星状细胞活化、增殖。
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