CD2AP突变对肾小球足细胞骨架蛋白F-actin分布的影响

被引:0
|
作者
赵彩霞 [1 ]
潘晓霞 [1 ]
冯晓蓓 [1 ]
隆琦 [1 ]
王伟铭 [1 ]
王朝晖 [1 ]
陈楠 [1 ]
机构
[1] 上海交通大学医学院瑞金医院肾脏内科
关键词
CD2相关蛋白; F-actin; 表达载体; 肾小球足细胞; 突变;
D O I
暂无
中图分类号
R692 [肾疾病];
学科分类号
1002 ; 100210 ;
摘要
目的构建突变型CD2相关蛋白(CD2AP)荧光表达载体并转染肾小球足细胞,观察细胞内骨架蛋白F-actin分布的变化。方法定点诱变真核表达质粒pcDNA6-V5-CD2AP致CD2AP第2外显子160G>A杂合突变,测序鉴定。利用野生型和突变型质粒和pEGFP-C1荧光表达载体,分别构建野生型和突变型重组质粒pEGFP-C1-CD2AP荧光表达载体并转染小鼠肾小球足细胞,荧光显微镜观察处于不同细胞周期的足细胞内F-actin分布情况。结果测序结果显示,pcDNA6-V5-CD2AP真核表达载体CD2AP的2号外显子第160位碱基G诱变为A,而其他碱基未发生改变。在细胞分裂间期,未转染足细胞内F-actin平行排列成纤维束;野生型重组质粒转染足细胞内F-actin在细胞核周围呈点、块状浓聚;而突变型重组质粒转染足细胞内F-actin主要在细胞膜上勾出轮廓。在细胞分裂中期,野生型重组质粒转染足细胞内F-acin纤维丝呈粗纤维状,环细胞浓聚;突变型重组质粒转染足细胞则仅见胞质内F-acin纤维丝增多,部分区域浓聚。结论成功构建野生型和突变型重组CD2AP荧光表达载体。CD2AP基因160G>A杂合突变使肾小球足细胞分裂间期和分裂中期的F-actin纤维骨架发生改变。
引用
收藏
页码:747 / 751
页数:5
相关论文
共 4 条
  • [1] CD2相关蛋白在足细胞分化中的作用
    姜华军
    常莹
    朱忠华
    刘建社
    邓安国
    张春
    [J]. 生理学报, 2008, (01) : 135 - 142
  • [2] 原发性局灶节段性肾小球硬化患者CD2AP基因突变的研究
    潘晓霞
    陈楠
    周伟
    王朝晖
    张文
    王伟铭
    陈晓农
    巫永睿
    陆颖
    [J]. 中华肾脏病杂志, 2006, (01) : 13 - 18
  • [3] Downregulation of CD2-associated protein impaired the physiological functions of podocytes
    Zhang, Chun
    Jiang, Hua-Jun
    Chang, Ying
    Fang, Zhan
    Sun, Xi-Feng
    Liu, Jian-She
    Deng, An-Guo
    Zhu, Zhong-Hua
    [J]. CELL BIOLOGY INTERNATIONAL, 2009, 33 (06) : 632 - 639
  • [4] Self- and actin-templated assembly of mammalian septins
    Kinoshita, M
    Field, CM
    Coughlin, ML
    Straight, AF
    Mitchison, TJ
    [J]. DEVELOPMENTAL CELL, 2002, 3 (06) : 791 - 802