电针治疗对缺血再灌注损伤大鼠Nrg-1/ErbB4信号通路抑制细胞凋亡的影响

目的电针治疗缺血性脑卒中所致神经功能障碍的机制尚有待深入研究。观察电针曲池、足三里穴对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血周围区皮质神经细胞内Nrg-1和ErbB4蛋白表达,探讨与凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的相关性。方法将120只成年雄性SD大鼠随机数字表法分为假手术组(只予以分离左侧颈部血管,不结扎、插线)、模型组(大脑中动脉闭塞/再灌注模型)、非穴位组(造模+非穴位刺激)、穴位组(造模+穴位刺激),每组40只。建立大脑中动脉闭塞/再灌注模型。穴位组电针曲池和足三里穴,非穴位组电针位点位于同侧非穴位下(腋窝纹状和尾端处)。应用TTC、TUNEL、免疫组化、Western Blot和实时荧光定量(RT-PCR)观察模型动物电针后3 d缺血半暗区Nrg-1、ErbB4、Bcl-2和Bax蛋白和mRNA表达。结果与假手术组比较,各组脑梗死体积和神经行为学评分均明显增加(P<0.01);与模型组和非穴位组比较,穴位组的梗死体积明显减少(P<0.05),神经行为学评分明显降低(P<0.05)。经TUNEL染色计数,与假手术组TUNEL阳性细胞[(3.78±0.82)%]比较,模型组[(31.24±1.31)%]、非穴位组[(30.13±1.43)%]、穴位组[(17.07±2.61)%]均显著增加(P<0.05);与模型组和非穴位组比较,穴位组的TUNEL阳性细胞明显减少(P<0.05)。与假手术组比较,模型组和非穴位组Bcl-2蛋白和mRNA表达显著下降(P<0.05),但Bax明显上调(P<0.05);与模型组和非穴位组比较,穴位组的Bcl-2蛋白和mRNA水平显著上调(P<0.05),Bax蛋白和mRNA表达降低(P<0.05)。与假手术组比较,各组Nrg-1和ErbB4的蛋白和mRNA的表达增加(P<0.05);与模型组和非穴位组比较,穴位组Nrg-1和ErbB4的蛋白和mRNA的表达增加(P<0.01)。结论针刺曲池、足三里可提高内源性Nrg-1及其受体ErbB4的表达,下调缺血半暗区Bax/Bcl-2比值,从而减轻细胞凋亡,改善脑缺血大鼠的神经功能缺损,在缺血性脑损伤中发挥神经保护作用,其机制可能与Nrg1/ErbB4信号通路相关。